Produk

Langkung ti 70% glioma kelas rendah mawa mutasi R132H hétérozigot dina coding gen pikeun isocitrate dehydrogénase 1 (IDH1).Ieu masihan énzim anu gaduh kamampuan novél pikeun ngarobih α-ketoglutarat janten 2-hydroxyglutarate, anu pamustunganana ngabalukarkeun tumorigenesis.Sumber utama produksi 2-hydroxyglutarate nyaéta glutamin, anu, dina kanker, ogé sumber pikeun anaplerosis siklus asam trikarboksilat (TCA).Sumber alternatif anaplerosis nyaéta fluks piruvat via piruvat karboksilase (PC), anu mangrupakeun jalur umum dina astrosit normal.Tujuan tina ulikan ieu pikeun nangtukeun naha PC boga fungsi minangka sumber TCA anaplerosis dina sél mutan IDH1 wherein glutamin dipaké pikeun 2-hydroxyglutarate production.Immortalized astrocytes manusa normal direkayasa pikeun nganyatakeun heterozygous mutant IDH1 atawa liar-tipe IDH1 ieu ditalungtik.Fluks piruvat via PC sareng via piruvat dehidrogénase (PDH) ditangtukeun ku ngagunakeun spéktroskopi résonansi magnét pikeun usik panyiri tina [2-¹³C] glukosa-turunan ¹³C-labe dipimpin glutamat sareng glutamin.Assays aktivitas, RT-PCR jeung western blotting dipaké pikeun usik ekspresi jeung aktivitas énzim relevan.Data Kanker Génom Atlas (TCGA) dianalisis pikeun meunteun éksprési énzim dina sampel glioma manusa. Dibandingkeun sareng sél tipe liar, sél IDH1 mutant sacara signifikan ningkatkeun fluks fraksional ngaliwatan PC.Ieu dikaitkeun sareng paningkatan anu signifikan dina kagiatan sareng ekspresi PC.Concurrently, aktivitas PDH nyata turun, dipikaresep dimédiasi ku ngaronjat sacara signifikan inhibitory PDH fosforilasi ku PDH kinase 3. Konsisten jeung observasi dina sél, analisis data TCGA dituduhkeun kanaékan signifikan dina éksprési PC dina mutant IDH-ekspresi sampel glioma manusa dibandingkeun wild- tipe IDH.Papanggihan kami nunjukkeun yén parobahan dina PC na PDH bisa jadi bagian penting tina adaptasi sélular kana mutasi IDH1 sarta bisa ngawula ka salaku target terapi poténsial.