Produk

Karusakan oksidatif basa DNA biasana nyababkeun kabentukna purin anu teroksidasi, khususna 7,8-dihydro-8-oxoguanine (8-oxoG) sareng 7,8-dihydro-8-oxoadenine (8-oxoA), anu baheula janten sumur- lesion mutagenic dipikawanoh.Kusabab 8-oxoG gampang tunduk kana oksidasi salajengna dibandingkeun sareng basa normal, sisipan basa nalika sintésis DNA sabalikna bentuk oksidasi 8-oxoG ditalungtik sacara in vitro.Témplat sintétik anu ngandung lesi 8-oxoG tunggal munggaran dirawat kalayan oksidan hiji-éléktron anu béda-béda atanapi dina kaayaan oksigén singlet, teras diasupkeun kana ekstensi primer anu dikatalisis ku fragmén Klenow exo- (Kf exo-), timus anak sapi DNA polymerase alpha (pol alpha). ) atawa DNA polimérase manusa béta (pol béta).Konsisten sareng laporan saméméhna, dAMP sareng dCMP diselapkeun sacara selektif sabalikna 8-oxoG sareng tilu polimérase DNA.Narikna, oksidasi 8-oxoG kapanggih pikeun ngainduksi dAMP jeung dGMP sisipan sabalikna lesion ku Kf exo- kalawan inhibisi samentara tina extension primer nu lumangsung dina loka basa dirobah.Saterusna, lesi constitutes blok salila sintésis DNA ku pol alfa jeung pol béta.Percobaan kalawan 8-oxoA-dirobah template oligonucleotide némbongkeun yén duanana 8-oxoA jeung formulir dioksidasi 8-oxoA sisipan langsung dTMP ku Kf exo-.Analisis spéktrométri massa oligonukléotida anu ngandung 8-oxoG saméméh jeung sanggeus oksidasi jeung IrCl62-konsisten jeung oksidasi utamana situs 8-oxoG, hasilna formasi guanidinohydantoin salaku produk utama.Teu aya bukti kabentukna situs abasic anu dicandak.Hasil ieu nunjukkeun yén bentuk oksidasi 8-oxoG, jigana guanidinohydantoin, tiasa nyababkeun salah maca sareng nyertakeun dNTP nalika sintésis DNA.Upami prosés sapertos kitu lumangsung dina vivo, éta bakal ngagambarkeun lesi mutagenik titik anu ngarah kana transversi G--> T sareng G--> C.Sanajan kitu, wangun oksidasi pakait tina 8-oxoA utamana nembongkeun sisipan bener T salila sintésis DNA jeung Kf exo-.