Produk

Topologi mémbran tina domain saluran colicin E1 diulik ku transfer énergi résonansi fluoresensi (FRET).FRET ngalibatkeun asam amino fluoresensi (coumarin) anu disandi sacara genetik salaku donor sareng résidu sistein anu dilabélan sacara selektif sareng DABMI (4-(dimethylamino)phenylazophenyl-4'-maleimide) salaku akséptor FRET.Résidu coumarin fluoresensi diasupkeun kana protéin ngaliwatan pasangan tRNA/aminoacyl-tRNA synthetase ortogonal nu ngidinan incorporation selektif kana sagala situs dina domain channel colicin.Unggal varian gaduh mutasi eureun (TAG) pikeun ngagabung kumarin sareng mutasi sistein (TGT) pikeun kantétan DABMI.Genep jarak interhélik dina hélik 1-6 ditangtukeun maké analisa FRET pikeun kaayaan larut jeung mémbran.Data FRET némbongkeun parobahan badag dina jarak interhélik antara hélik 3-6 kana asosiasi mémbran nyadiakeun wawasan anyar kana struktur mémbran-kabeungkeut domain channel.Sacara umum, efisiensi interhélik coumarin-DABMI FRET turun nalika beungkeutan mémbran, ngawangun kana modél payung pikeun saluran colicin.Modél saheulaanan pikeun kaayaan katutup tina domain saluran dikembangkeun dumasar kana data FRET anu ayeuna sareng sateuacana diterbitkeun.Model ieu nunjukkeun susunan sirkular hélik 1-7 dina arah jarum jam ti sisi ekstrasélular sareng asosiasi antarmuka mémbran hélik 1, 6, 7, sareng 10 di sabudeureun jepit rambut transmembran sentral anu dibentuk ku hélik 8 sareng 9.