Produk

LecA (PA-IL) nyaéta lektin sitotoksik sareng adhesin anu diproduksi ku Pseudomonas aeruginosa anu ngabeungkeut galaktosida hidrofobik kalayan spésifisitas sareng afinitas anu luhur.Ku ngagunakeun fusi tarjamahan lecA-egfp sareng analisis immunoblot tina matriks ekstrasélular biofilm, kami nunjukkeun yén lecA dinyatakeun dina sél anu tumbuh biofilm.Dina tes biofilm statik dina duanana polystyrene sareng stainless steel, jero biofilm sareng cakupan permukaan dikirangan ku mutasi lecA sareng ditingkatkeun dina galur PAO-P47 anu overproducing LecA.Liputan permukaan biofilm ku galur induk, PAO-P47 tapi sanes mutant lecA dina kupon baja ogé dihambat ku pertumbuhan ku ayana isopropil-beta-D-thiogalactoside (IPTG) atanapi p-nitrophenyl-alpha-D-galactoside ( NPG).Satuluyna, biofilm tipe liar dewasa anu dibentuk dina henteuna galaktosida hidrofobik ieu bisa dibubarkeun ku tambahan IPTG.Kontras, tambahan p-nitrophenyl-alpha-L-fucose (NPF) nu boga afinitas tinggi pikeun P. aeruginosa LecB (PA-IIL) lecti n teu boga pangaruh dina formasi biofilm atawa dispersal.Pertumbuhan planktonik P. aeruginosa PAO1 henteu kapangaruhan ku ayana IPTG, NPG atanapi NPF, sareng galur henteu tiasa ngamangpaatkeun gula ieu salaku sumber karbon, nunjukkeun yén épék anu dititénan dina formasi biofilm éta kusabab inhibisi kompetitif LecA-ligan. ngariung.Hasil anu sami ogé dicandak pikeun biofilm anu tumbuh dina kaayaan aliran dinamis dina kupon baja, nunjukkeun yén LecA nyumbang kana arsitéktur biofilm P. aeruginosa dina kaayaan lingkungan anu béda.

Alfa-L-fucosidase (EC 3.2.1.51) bisa ngaleupaskeun résidu t-fukosil tina ranté samping oligosakarida xyloglucan geus dideteksi dina daun tutuwuhan Arabidopsis.Sumawona, alfa-L-fucosidase kalayan spésifisitas substrat anu sami dimurnikeun tina daun kol (Brassica oleracea) pikeun ngajantenkeun pita tunggal dina SDS-PAGE.Dua sekuen péptida dicandak ti pita protéin ieu, sarta dipaké pikeun ngaidentipikasi hiji coding gén Arabidopsis pikeun alfa-fucosidase nu urang ngajukeun nelepon AtFXG1.Sajaba ti éta, hiji gén Arabidopsis kalawan homologi kalawan alfa-L-fucosidases dipikawanoh ogé geus kapanggih, sarta kami diusulkeun pikeun ngaranna éta AtFUC1.Duanana AtFXG1 sareng ATFUC1 sacara heterolog dikedalkeun dina sél Pichia pastoris sareng kagiatan alfa-L-fucosidase disékrésikeun kana médium kultur.Alfa-L-fucosidase anu disandi ku AtFXG1 aktip ngalawan oligosakarida tina xyloglucan XXFG ogé ngalawan 2'-fucosyl-lactitol tapi henteu ngalawan p-nitrophenyl-alpha-L-fucopyranoside.Nanging, AtFUC1 sacara heterolog diekspresikeun ngan ukur aktif ngalawan 2'-fucosyl-lactitol.Ku kituna, urut kudu patali jeung métabolisme xyloglucan.