Produk

Monogalactopyranosides of fluorescein and fluorescein metil éster: sintésis, hidrolisis énzimatik ku biotnylated β-galactosidase, jeung penentuan koefisien difusi translasi

Monoglycosides fluorescein (d-galactopyranoside (FMG) jeung d-glucopyranoside) jeung metil ésterna (MFMG) geus disusun tina acetobromoglucose/galaktosa jeung fluorescein metil éster dina ngahasilkeun alus.Percobaan hidrolisis enzimatik (menggunakan biotinilasi β-galaktosidase) dari turunan galakto telah dilakukan dan parameter kinetik dihitung.Paningkatan 15-20 kali tina inténsitas fluoresensi geus katalungtik salila hidrolisis.Paningkatan linier fluoresensi parantos kacatet dina waktos anu pondok sareng konsentrasi substrat anu rendah, ngajantenkeun sanyawa ieu mangpaat sareng sénsitip panyilidikan pikeun galaktosidase.Gedéna nilai konstanta Michaelis-Menten (Km) pikeun MFMG leuwih luhur batan FMG nunjukkeun kamungkinan parobahan konformasi substrat fluorogenik.Nilai Km pikeun β-Gal biotinilasi sareng FMG langkung handap tibatan énzim asli.Observasi ieu nunjukkeun afinitas substrat anu langkung luhur tina énzim biotinilasi dibandingkeun sareng énzim asli.Koéfisién difusi translasi geus diukur, boh substrat fluorogenik boh produkna, ngagunakeun spéktroskopi korelasi fluoresensi.Koéfisién difusi translasi pikeun substrat fluorogenik jeung produk hidrolisis énzimatik geus diukur sarua, dina rentang 3.5–4.5 × 10−10 m2 s−1.Ku kituna paningkatan atanapi retardasi kinétik énzimatik kusabab bédana mobilitas translasi substrat sareng produk henteu katingali.